利用斑馬魚評(píng)價(jià)供試品急性胚胎毒性

【評(píng)價(jià)原理】

急性毒性試驗(yàn)是了解外源化學(xué)物對(duì)機(jī)體產(chǎn)生急性毒性的根本依據(jù)，也是毒理學(xué)安全性評(píng)價(jià)的第一步工作，斑馬魚早期發(fā)育階段的胚胎期是其對(duì)外界環(huán)境最為敏感的階段。斑馬魚的急性胚胎毒性對(duì)于化妝品的安全性評(píng)價(jià)具有重要的實(shí)際意義。毒性機(jī)制包括改變胚胎全基因表達(dá)、microRNA 表達(dá)及心臟AhR和Wnt/β-catenin 通路相關(guān)基因表達(dá)等，導(dǎo)致胚胎毒性。斑馬魚胚胎發(fā)育快、通體透明，被廣泛應(yīng)用于供試品的急性毒性評(píng)價(jià)。 

將斑馬魚胚胎暴露于不同濃度的受試物溶液，一定時(shí)間段后記錄斑馬魚胚胎的死亡率，確定50%試驗(yàn)魚胚胎死亡的受試物濃度，用LC50表示。

【實(shí)驗(yàn)方案】

配制一定濃度系列的受試物溶液，在斑馬魚發(fā)育初期（4hpf-6hpf）分別水溶加入受試物，同時(shí)設(shè)置正常對(duì)照組，孵育一定時(shí)間后分別觀察每組斑馬魚的發(fā)育狀況，以卵凝結(jié)、體節(jié)異常、尾部未分離等判定胚胎死亡。記錄每組斑馬魚胚胎的死亡率，繪制“濃度-死亡率”效應(yīng)曲線，計(jì)算LC50值。

【評(píng)價(jià)指標(biāo)】

1、LC50

【結(jié)果展示】（展示圖片僅供參考，實(shí)際實(shí)驗(yàn)組別依據(jù)合同而定）

1、斑馬魚胚胎死亡判定（包含但不限于以下幾張類型）

圖1. 斑馬魚胚胎死亡判定表型圖

2、LC50值：“濃度-死亡率”效應(yīng)曲線

圖2. 斑馬魚胚胎“濃度-死亡率”效應(yīng)曲線

【評(píng)價(jià)結(jié)論】

斑馬魚胚胎隨著受試物濃度的增加逐漸出現(xiàn)死亡特征，LC50值為31.5μg/ml。

【參考文獻(xiàn)】

[1] OECD GUIDELINES FOR THE TESTING OF CHEMICALS：Fish Embryo Acute Toxicity (FET) Test