利用斑馬魚評價(jià)供試品補(bǔ)水保濕功效

【評價(jià)原理】

斑馬魚表皮具有一定的滲透壓耐受范圍，超過耐受范圍將產(chǎn)生脫水現(xiàn)象，尾部面積也會變小，因此使用高滲透溶液可以建立斑馬魚補(bǔ)水保濕的誘導(dǎo)模型。水通道蛋白（Aquaporin, AQP）廣泛存在于生物體的各組織部位,影響著生物體水代謝的過程。AQP3 在表皮基底及棘突層的角質(zhì)形成細(xì)胞質(zhì)膜中高度表達(dá)，并在這些質(zhì)膜中作為水、甘油運(yùn)輸?shù)鞍?，促進(jìn)皮膚水合作用。人類透明質(zhì)酸合成酶（HAS）是一類在透明質(zhì)酸（HA）合成過程中發(fā)揮重要作用的酶，HAS3在表皮透明質(zhì)酸的合成中起主要作用。分析斑馬魚尾部面積，檢測HAS3、AQP3基因表達(dá)量，在一定程度上可以評價(jià)供試品補(bǔ)水保濕作用。

【實(shí)驗(yàn)方法】

將受測試斑馬魚分成三組，分別是正常對照組、模型對照組和供試品組。正常對照組不做處理，模型對照組用氯化鈉溶液處理，供試品組在用氯化鈉處理的同時(shí)定量加入受試的化妝品。孵育一段時(shí)間后，對斑馬魚進(jìn)行拍照分析斑馬魚尾部面積，qPCR試劑盒檢測HAS3基因表達(dá)量、AQP3基因表達(dá)量，評價(jià)供試品的補(bǔ)水保濕功效。

【評價(jià)指標(biāo)】

1、斑馬魚尾部面積

2、HAS3基因表達(dá)量

3、AQP3基因表達(dá)量

【結(jié)果展示】（展示圖片僅供參考，實(shí)際實(shí)驗(yàn)組別依據(jù)合同而定）

1、斑馬魚尾部面積（表型圖）

圖1. 斑馬魚尾部面積（紅色區(qū)域?yàn)槲膊棵娣e）

2、HAS3基因表達(dá)量、AQP3基因表達(dá)量為柱狀圖（略）

【評價(jià)結(jié)論】

1、經(jīng)過各組斑馬魚的對比實(shí)驗(yàn)，供試品組的斑馬魚尾部面積與正常對照組相似，沒有出現(xiàn)明顯的皺縮，HAS3、AQP3基因表達(dá)量增加。

2、本實(shí)驗(yàn)證實(shí)了該供試品具有明顯的補(bǔ)水保濕功效。

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