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【實(shí)驗(yàn)原理】
機(jī)械損傷將產(chǎn)生皮膚組織的結(jié)構(gòu)性破壞,斑馬魚(yú)尾鰭具有強(qiáng)大的自我再生功能。切斷尾鰭后,傷口立即緊縮、上皮細(xì)胞覆蓋,數(shù)小時(shí)內(nèi)出現(xiàn)炎癥反應(yīng),傷口處中性粒細(xì)胞的數(shù)量增多,轉(zhuǎn)基因中性粒細(xì)胞熒光斑馬魚(yú)的中性粒細(xì)胞可在熒光顯微鏡下被明顯觀察。因此可以通過(guò)尾鰭再生速度、傷口附近的中性粒細(xì)胞數(shù)量評(píng)價(jià)供試品修復(fù)功效。
【實(shí)驗(yàn)方法】
將斑馬魚(yú)分成三組,分別是正常對(duì)照組、模型對(duì)照組和供試品組。正常對(duì)照組不做處理,模型對(duì)照組和供試品組均采用手術(shù)方法定量切斷尾鰭,從而完成造模處理,供試品組中添加一定濃度的受試化妝品。避光孵育一段時(shí)間后,將各組斑馬魚(yú)在體視顯微鏡下拍照并保存圖片,用高級(jí)圖像分析軟件對(duì)斑馬魚(yú)尾鰭面積進(jìn)行定量分析;用高級(jí)圖像分析軟件對(duì)斑馬魚(yú)尾鰭損傷部位的中性粒細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)。
【評(píng)價(jià)指標(biāo)】
1、組織再生-損傷部位恢復(fù)
2、傷口愈合-損傷部位炎癥細(xì)胞數(shù)量
【結(jié)果展示】
(*展示圖片僅供參考,實(shí)際實(shí)驗(yàn)組別依據(jù)合同而定)
1、斑馬魚(yú)尾鰭面積
圖1. 斑馬魚(yú)尾鰭面積表型圖
2、尾鰭損傷部位中性粒細(xì)胞、炎癥因子的表達(dá)量(提供柱狀圖)
圖2 斑馬魚(yú)尾鰭中性粒細(xì)胞表型圖黃色虛線區(qū)域?yàn)橛?jì)算區(qū)域,綠色熒光點(diǎn)為中性粒細(xì)胞
【評(píng)價(jià)結(jié)論】
1、經(jīng)過(guò)斑馬魚(yú)對(duì)比實(shí)驗(yàn),供試品組與模型對(duì)照組相比,斑馬魚(yú)尾鰭面積明顯增加。
2、經(jīng)過(guò)各組斑馬魚(yú)的對(duì)比實(shí)驗(yàn),供試品組的斑馬魚(yú)中性粒細(xì)胞數(shù)目與模型對(duì)照組相比明顯減少。
3、本實(shí)驗(yàn)證實(shí)了該供試品具有修護(hù)功效。
【參考文獻(xiàn)】
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