利用微生物評(píng)價(jià)供試品祛痘功效

痤瘡丙酸桿菌抑菌實(shí)驗(yàn)方案

【評(píng)價(jià)原理】

痤瘡丙酸桿菌(Propionibacterium acnes)，也稱(chēng)痤瘡桿菌、瘡皰丙酸桿菌，是造成青春痘的主要細(xì)菌?；蚪M研究顯示該細(xì)菌的幾個(gè)基因能夠制造一些分解皮膚組織的酶和免疫原性的蛋白質(zhì)。痤瘡丙酸桿菌是皮膚上的優(yōu)勢(shì)菌群，棲居于毛囊、皮脂腺內(nèi)，可從人的鼻咽、口腔、腸道和泌尿道中分離。而痤瘡丙酸桿菌的大量增殖是引起痘痘形成和加重的重要因素之一。

利用抑菌劑不斷溶解經(jīng)瓊脂擴(kuò)散形成不同濃度梯度，以顯示其抑菌作用。通過(guò)抑菌環(huán)大小以判斷供試品是否具有抑菌能力。

【實(shí)驗(yàn)方法】

取空白無(wú)菌藥敏紙片（或牛津杯），用無(wú)菌鑷子蘸取待檢少許樣品于紙片上，涂抹均勻。取痤瘡丙酸桿菌菌懸液100 uL（5×10^5 ～ 5×10^6 CFU/mL）在BHI平板培養(yǎng)基上用L型涂布棒均勻涂布（以平板無(wú)可見(jiàn)水滴為準(zhǔn)）。隨后進(jìn)行抑菌試驗(yàn)樣片貼放：每次試驗(yàn)貼放1個(gè)染菌平板，每個(gè)平板貼放4片試驗(yàn)樣片，1片對(duì)照樣片，共5片。貼放完畢后用無(wú)菌鑷子輕壓樣片，使其緊貼于平板表面。蓋好平皿，置 36 ℃溫箱，厭氧培養(yǎng)3-5 d后觀察結(jié)果。該試驗(yàn)重復(fù)3次。

【評(píng)價(jià)指標(biāo)】抑菌環(huán)的大小

【結(jié)果展示】（展示圖片僅供參考，實(shí)際實(shí)驗(yàn)組別依據(jù)合同而定）

圖1 抑菌環(huán)大小表型圖

【評(píng)價(jià)結(jié)論】

1、抑菌環(huán)直徑大于7 mm，判為有抑菌作用；3次重復(fù)試驗(yàn)（共12個(gè)樣片）均有抑菌作用，判為合格。

2、本實(shí)驗(yàn)初步證實(shí)了該供試品具有痤瘡丙酸桿菌抑制作用。

【參考文獻(xiàn)】

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[2]WS/T650-2019 抗菌和抑菌效果評(píng)價(jià)方法-5.1.4抑菌環(huán)試驗(yàn)

[3] 王慶芬;楊育儒;沈秋蓮;張榮.枇芩顆粒劑體外抑制金黃色葡萄球菌和痤瘡丙酸桿菌的作用.中國(guó)現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué)，2015（12）

[4]QB/T 2738-2012 日化產(chǎn)品抗菌抑菌效果的評(píng)價(jià)方法