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【評(píng)價(jià)原理】
斑馬魚的聽覺外側(cè)系統(tǒng)由內(nèi)耳和側(cè)線兩個(gè)關(guān)鍵的感覺結(jié)構(gòu)組成,斑馬魚具有典型的內(nèi)耳結(jié)構(gòu),內(nèi)耳的毛細(xì)胞和側(cè)線的毛細(xì)胞在結(jié)構(gòu)功能及分子水平上與哺乳動(dòng)物的內(nèi)耳毛細(xì)胞非常相似,包括對(duì)耳毒性藥物的相似反應(yīng)。
經(jīng)過DASPEI特異性熒光染色(呈綠色),聽力損傷的斑馬魚比正常斑馬魚毛細(xì)胞明顯減少或缺失(熒光減弱或者消失)。
【實(shí)驗(yàn)方案】
我們將受測試斑馬魚分成兩組,分別是正常對(duì)照和服用/注射供試品組(供試品通過溶解到養(yǎng)魚用水中或注射的方式攝入到斑馬魚體內(nèi))。
服用/注射藥物一段時(shí)間后,我們對(duì)斑馬魚整體做毛細(xì)胞特異性染色,觀察毛細(xì)胞的變化。
【結(jié)果展示】
圖1. 斑馬魚“濃度-死亡率”效應(yīng)曲線
供試品最大非致死濃度(MNLC)和LC10
圖2. 斑馬魚毛細(xì)胞表型圖(綠色熒光點(diǎn)為聽細(xì)胞聚集的神經(jīng)丘)
可以看到,服用/注射供試品組斑馬魚毛細(xì)胞減少。
【評(píng)價(jià)結(jié)論】
1.經(jīng)過每組30尾斑馬魚的對(duì)比實(shí)驗(yàn),服用/注射供試品組的斑馬魚毛細(xì)胞明顯減少,與正常對(duì)照組存在明顯的差別。
2.本實(shí)驗(yàn)證實(shí)了該供試品對(duì)斑馬魚有聽毒性。