利用斑馬魚模型檢測類雌激素物質(zhì)

【評價原理】

OECD近年大力推崇的“有害結(jié)局路徑”（Adverse Outcome Pathway，AOP）毒性評估策略來測試類雌激素這一大類有害物質(zhì)。本方法參照糧農(nóng)組織和世界衛(wèi)生組織（FAO/WHO，2000）關(guān)于類雌激素物質(zhì)最高日攝取量來評估測試物的安全性，通過轉(zhuǎn)基因標記技術(shù)表達的綠色熒光蛋白含量來量化類雌激素物質(zhì)含量，綠色熒光蛋白特異性地在肝臟表達，一旦供試品中含一定量的類雌激素化學物質(zhì)，雌激素轉(zhuǎn)基因斑馬魚暴露后肝臟部位會出現(xiàn)綠色熒光，可用綠色熒光量化供試品中的類雌激素物質(zhì)含量，從而達到檢測效果。

【實驗方案】

我們將受測試斑馬魚分成兩組，分別是正常對照和供試品組（供試品通過溶解到養(yǎng)魚用水或注射的方式攝入到斑馬魚體內(nèi)）。

攝入供試品一段時間后，我們在熒光顯微鏡下觀察斑馬魚肝臟熒光。

【結(jié)果展示】

圖1.含類雌激素物質(zhì)的供試品處理后斑馬魚熒光表型圖

黃色曲線部位為肝臟，綠色熒光量化類雌激素含量

可以看到，攝入供試品組肝臟部位有明顯的綠色熒光。

【評價結(jié)論】

1.經(jīng)過每組30尾斑馬魚的對比實驗，攝入含類雌激素物質(zhì)的供試品組斑馬魚肝臟熒光明顯，與正常對照組存在明顯差別。

2.本實驗證實了該供試品含有類雌激素物質(zhì)。