利用斑馬魚模型評價氧化應(yīng)激

【評價原理】

斑馬魚的基因與人類基因的相似度達到87％，與哺乳動物對外源化學(xué)物質(zhì)的防御機制相當(dāng)，包括酶的誘導(dǎo)和氧化應(yīng)激。當(dāng)生物暴露在環(huán)境污染物中，生物可能會發(fā)生氧化應(yīng)激，主要表現(xiàn)為活性氧（ROS）產(chǎn)生和消耗的不平衡。在需氧生物的活細(xì)胞中，活性氧被一種由水和脂溶性低分子量自由基清除劑、特異性抗氧化酶組成的抗氧化防御機制解毒。

 應(yīng)用ROS特異性熒光檢測試劑，它的水解產(chǎn)物能被ROS氧化為高熒光物質(zhì)，用多功能酶標(biāo)儀檢測熒光值反映氧化應(yīng)激的程度。本方法已被授予國家發(fā)明專利。

【實驗方案】

我們將受測試斑馬魚分成三組，分別是底物對照組、正常對照和服用供試品組（供試品通過溶解到養(yǎng)魚用水中攝入到斑馬魚體內(nèi)），并加入ROS特異性熒光檢測試劑。

服用供試品一段時間后，我們使用酶標(biāo)儀對斑馬魚體內(nèi)ROS進行熒光定量。

【結(jié)果展示】

圖1. 斑馬魚體內(nèi)ROS熒光值

可以看到，服用供試品組斑馬魚體內(nèi)熒光值比正常對照組有明顯升高。

【評價結(jié)論】

1.經(jīng)過每組30尾斑馬魚的對比實驗，服用供試品組的斑馬魚ROS水平明顯高于正常對照組，與正常對照組存在顯著性差異。

2.本實驗證實了該供試品誘發(fā)斑馬魚氧化應(yīng)激。