利用斑馬魚模型評價肝臟毒性

【評價原理】

斑馬魚的基因與人類基因的相似度達(dá)到87％，斑馬魚肝臟中有許多與哺乳動物同源的脂質(zhì)代謝酶，與哺乳動物對外源化學(xué)物質(zhì)的防御機(jī)制相當(dāng)，包括酶的誘導(dǎo)和氧化應(yīng)激。而且斑馬魚幼魚通體透明，容易觀察到毒性表型。

我們評價斑馬魚肝臟毒性有4個指標(biāo)：1.肝臟面積；2.肝臟變性程度；3. 卵黃囊吸收延遲的發(fā)生率（卵黃囊是脂肪，卵黃囊吸收與肝功能密切相關(guān)）；4. 肝臟病理切片。

【實驗方案】

我們將受測試斑馬魚分成兩組，分別是正常對照和服用/注射供試品組（供試品通過溶解到養(yǎng)魚用水中或注射的方式攝入到斑馬魚體內(nèi)）。

服用/注射藥物一段時間后，我們觀察斑馬魚肝臟及卵黃囊表型，同時制作成病理切片觀察肝臟的病理結(jié)構(gòu)變化。

【結(jié)果展示】

圖1. 斑馬魚肝臟毒性表型圖

可以看到，服用/注射供試品組斑馬魚肝臟腫大、變性、卵黃囊吸收延遲。

圖2. 斑馬魚肝臟病理切片（綠色箭頭指向紅細(xì)胞淤積）

從病理切片中可見，正常對照組肝組織結(jié)構(gòu)規(guī)則，肝細(xì)胞形態(tài)完整，細(xì)胞質(zhì)均勻，細(xì)胞核呈規(guī)則圓形，位于細(xì)胞中央；服用/注射供試品組的斑馬魚肝臟紅細(xì)胞淤積嚴(yán)重，細(xì)胞腫脹現(xiàn)象嚴(yán)重，細(xì)胞核萎縮變形，位于細(xì)胞邊緣，局部可見炎性浸潤，壞死。

【評價結(jié)論】

1.經(jīng)過每組30尾斑馬魚的對比實驗，服用/注射供試品組的斑馬魚肝臟產(chǎn)生明顯的毒性表型且組織病理學(xué)改變，與正常對照組存在明顯的差別。

2.本實驗證實了該供試品對斑馬魚有肝臟毒性。