利用斑馬魚模型評價眼毒性

【評價原理】

斑馬魚胚胎視力發(fā)育迅速，受精后發(fā)育4天的幼魚就已經(jīng)依賴視覺線索進行捕食和躲避行為。斑馬魚不僅在角膜、晶狀體、脈絡膜、視網(wǎng)膜以及血管化和神經(jīng)支配等結構上和人類的眼睛有明顯的相似性，而且還有保守的基因表達、細胞構成和組織結構，因此為研究食品及保健品的眼部毒性提供了一個極好的模型。

我們評價斑馬魚眼毒性有4個指標：1.眼睛大小；2.眼部細胞凋亡；3.眼部血管面積；4.眼部病理切片。

【實驗方案】

我們將受測試斑馬魚分成兩組，分別是正常對照組和供試品組，供試品組（保健食品通過溶解到養(yǎng)魚用水中或灌胃的方式攝入到斑馬魚體內）。

服用一段時間眼保護劑后，我們在解剖顯微鏡下觀察眼睛大??；整體做凋亡細胞特異性染色，觀察眼部細胞凋亡；通過熒光顯微鏡觀察眼部血管面積，同時制作成病理切片觀察眼部的病理結構變化。

【結果展示】

圖1. 斑馬魚眼睛表型圖（箭頭指示區(qū)域為眼）

可以看到，保健食品組眼睛相較于正常對照組明顯減小。

圖2. 斑馬魚眼細胞凋亡表型圖（黃色虛線區(qū)域為眼，綠色小點為凋亡細胞）

可以看到，保健食品組的凋亡細胞較正常對照組明顯增多。

圖3. 斑馬魚眼部血管面積（黃色虛線標記血管面積）

可以看到，保健食品組眼睛血管面積相較于正常對照組明顯增加。

圖4. 眼部凋亡細胞病理切片

可以看到，保健食品組出現(xiàn)較多的凋亡細胞，表現(xiàn)為細胞固縮、染色質邊集，視網(wǎng)膜結構異于正常對照組。

【評價結論】

1.經(jīng)過每組30尾斑馬魚的對比實驗，保健食品組斑馬魚眼睛明顯變小，凋亡細胞明顯增多，眼部血管面積明顯增多，在病理切片中出現(xiàn)較多的凋亡細胞，表現(xiàn)為細胞固縮、染色質邊集，視網(wǎng)膜結構異常。

2.本實驗證實了保健食品的眼毒性。