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【評(píng)價(jià)原理】
甲萘醌是一種氧化劑,通過(guò)細(xì)胞內(nèi)還原酶系統(tǒng)(微粒體的P450還原酶和線粒體的呼吸鏈還原酶),產(chǎn)生不穩(wěn)定的半醌,進(jìn)入氧化還原循環(huán),產(chǎn)生活性氧族。用甲萘醌可誘導(dǎo)斑馬魚(yú)建立氧化應(yīng)激模型。
經(jīng)過(guò)特異性熒光染色(呈綠色,主要定位于細(xì)胞核和線粒體),發(fā)生氧化應(yīng)激反應(yīng)斑馬魚(yú)全身明顯比正常斑馬魚(yú)綠很多,可以用熒光顯微鏡下觀察到斑馬魚(yú)體內(nèi)的活性氧含量。
【實(shí)驗(yàn)方案】
我們將受測(cè)試斑馬魚(yú)分成三組,分別是正常對(duì)照組、模型對(duì)照組和抗氧化劑組。其中正常對(duì)照組未攝入甲萘醌,模型對(duì)照組與抗氧化劑組都攝入了等量的甲萘醌(甲萘醌通過(guò)溶解到養(yǎng)魚(yú)用水中的方式攝入到斑馬魚(yú)體內(nèi))??寡趸瘎┙M在攝入甲萘醌之后攝入還原型谷胱甘肽之類的抗氧化劑。
服用一定時(shí)間抗氧化劑后,我們對(duì)斑馬魚(yú)整體做活性氧染色,觀察整體綠色熒光強(qiáng)度的變化。
【結(jié)果展示】
圖1. 斑馬魚(yú)活性氧表型圖。(綠色熒光為活性氧)
可以看到,抗氧化劑組的熒光強(qiáng)度較正常對(duì)照組強(qiáng),但較模型對(duì)照組明顯減弱。
【評(píng)價(jià)結(jié)論】
1.經(jīng)過(guò)每組30尾斑馬魚(yú)的對(duì)比實(shí)驗(yàn),抗氧化劑組的熒光強(qiáng)度比模型對(duì)照組弱。
2.本實(shí)驗(yàn)證實(shí)了還原型谷胱甘肽具有明顯抗氧化功效。