利用斑馬魚模型評(píng)價(jià)耐缺氧功效（氯化鈷）

【評(píng)價(jià)原理】

缺氧可能導(dǎo)致心血管系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)、消化系統(tǒng)等等一系列危害身體的疾病。斑馬魚心血管系統(tǒng)在分子信號(hào)通路上與人和哺乳動(dòng)物的同源性達(dá)到85%以上,近年來斑馬魚廣泛地被用于心血管疾病研究領(lǐng)域。因此，斑馬魚適用于評(píng)價(jià)耐缺氧功效。鈷離子作用細(xì)胞后，可直接取代類血紅素中的鐵離子，使類血紅素不能和氧結(jié)合而保持脫氧狀態(tài)，從而模擬缺氧。

經(jīng)過行為分析儀檢測(cè)，缺氧的斑馬魚的總運(yùn)動(dòng)距離會(huì)明顯比正常斑馬魚明顯減少；經(jīng)過凋亡細(xì)胞特異性熒光染色（呈綠色），斑馬魚腦部細(xì)胞凋亡可以被觀察到。

【實(shí)驗(yàn)方案】

我們將受測(cè)試斑馬魚分成三組，分別是正常對(duì)照組、模型對(duì)照組和服用耐缺氧劑組。其中正常對(duì)照組未服用氯化鈷，模型對(duì)照組與服用耐缺氧劑組都攝入了等量的氯化鈷（氯化鈷通過溶解到養(yǎng)魚用水中的方式攝入到斑馬魚體內(nèi)）。服用耐缺氧劑組在攝入氯化鈷之前攝入紅景天苷之類的耐缺氧劑。

服用耐缺氧劑一段時(shí)間后，我們對(duì)斑馬魚進(jìn)行行為分析，分析其總運(yùn)動(dòng)距離；同時(shí)對(duì)斑馬魚進(jìn)行凋亡細(xì)胞染色，觀察腦細(xì)胞凋亡情況。

【結(jié)果展示】

圖1. 斑馬魚運(yùn)動(dòng)軌跡圖

黑線：斑馬魚靜止運(yùn)動(dòng)軌跡；綠線：中速運(yùn)動(dòng)；紅線：快速運(yùn)動(dòng)

可以看到，服用耐缺氧劑組的總運(yùn)動(dòng)距離與未服用氯化鈷的正常對(duì)照組比較相似，沒有明顯的運(yùn)動(dòng)減少。

圖2. 缺氧導(dǎo)致的腦細(xì)胞凋亡表型圖（計(jì)算黃色區(qū)域內(nèi)的凋亡細(xì)胞）

可以看到，服用耐缺氧劑組的腦部細(xì)胞與未服用氯化鈷的正常對(duì)照組比較相似，沒有明顯的凋亡細(xì)胞。

【評(píng)價(jià)結(jié)論】

1.經(jīng)過每組30尾斑馬魚的對(duì)比實(shí)驗(yàn)，服用耐缺氧劑組的總運(yùn)動(dòng)距離和腦部凋亡細(xì)胞與正常對(duì)照組相似，并未出現(xiàn)模型對(duì)照組總運(yùn)動(dòng)距離減少和腦部凋亡細(xì)胞增多的情況。

2.本實(shí)驗(yàn)證實(shí)了紅景天苷具有明顯的耐缺氧功效。