【評價原理】
臨床上顯示常見的青光眼視神經(jīng)病變、糖尿病性視網(wǎng)膜病變以及視網(wǎng)膜中央動靜脈阻塞等疾病的發(fā)生都與缺氧有關(guān)系。組織的缺氧被視為視網(wǎng)膜血管疾病的重要原因，而與血管相關(guān)的視網(wǎng)膜疾病恰恰是臨床上導(dǎo)致視力喪失的最主要原因。斑馬魚視網(wǎng)膜結(jié)構(gòu)與人類高度相似，這使得斑馬魚胚胎能夠模擬視網(wǎng)膜新生血管，為在短時間內(nèi)快速評估功效提供了模型。
氯化鈷是廣泛使用的化學(xué)缺氧模擬劑，其鈷可以取代特定前體羥化酶中的鐵離子，使羥化活性失活。缺氧條件下，能夠誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄因子（HIF）和血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）的表達(dá)，誘發(fā)新生血管形成。
采用轉(zhuǎn)基因血管內(nèi)皮細(xì)胞綠色熒光斑馬魚，可在熒光顯微鏡在觀察到缺氧的斑馬魚視網(wǎng)膜血管明顯增多增粗，同時制作病理切片，進(jìn)行蘇木素-伊紅染色，觀察視網(wǎng)膜結(jié)構(gòu)變化。
【實(shí)驗(yàn)方案】
我們將受測試斑馬魚分成三組，分別是正常對照組、模型對照組和延緩視力退化產(chǎn)品組。其中正常對照組未攝入氯化鈷，模型對照組與延緩視力退化產(chǎn)品組都攝入了等量的氯化鈷（氯化鈷通過溶于魚水的方式攝入到斑馬魚體內(nèi)）。延緩視力退化產(chǎn)品組在攝入氯化鈷的同時給予施圖倫滴眼液、藍(lán)莓提取物之類的延緩視力退化產(chǎn)品。
使用一段時間延緩視力退化產(chǎn)品后，我們在熒光顯微鏡下觀察斑馬魚視網(wǎng)膜血管的變化，同時制作成病理切片觀察視網(wǎng)膜的病理結(jié)構(gòu)變化。
【結(jié)果展示】
圖1. 斑馬魚視網(wǎng)膜血管表型圖
可以看到，服用延緩視力退化產(chǎn)品組的視網(wǎng)膜血管面積與正常對照組比較相似，沒有明顯的血管增多增粗。
圖2. 視網(wǎng)膜結(jié)構(gòu)表型圖
從病理切片中也能看出來，模型斑馬魚眼睛病理切片的色素上皮層和外核層結(jié)構(gòu)紊亂、變薄，而服用延緩視力退化產(chǎn)品組的色素上皮層和外核層結(jié)構(gòu)均有所恢復(fù)。
【評價結(jié)論】
1、經(jīng)過每組30尾斑馬魚的對比實(shí)驗(yàn)，服用延緩視力退化產(chǎn)品組的視網(wǎng)膜血管和病理結(jié)構(gòu)與正常對照組相似，并未出現(xiàn)模型對照組視網(wǎng)膜血管增多增粗和視網(wǎng)膜結(jié)構(gòu)紊亂的情況。
2、本實(shí)驗(yàn)證實(shí)了施圖倫滴眼液、藍(lán)莓提取物具有明顯的延緩視力退化功效。
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