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【評價原理】
斑馬魚是一種與人類同源性較高的脊椎動物,大腦具有典型脊椎動物腦部形態(tài)學(xué)特征,髓鞘結(jié)構(gòu)特征和少突膠質(zhì)細胞分化過程與哺乳動物高度一致。而且斑馬魚生長發(fā)育周期短,神經(jīng)系統(tǒng)簡單,有利于開展腦保護劑的研究。中樞神經(jīng)損傷常表現(xiàn)為偏癱、失語、智力障礙或昏迷,甚至死亡。霉酚酸嗎啉乙酯可以抑制斑馬魚神經(jīng)元軸突的生長,干擾神經(jīng)及細胞的遷移和導(dǎo)致發(fā)育畸形,使神經(jīng)元細胞凋亡,可用于制造中樞神經(jīng)損傷的斑馬魚模型。
經(jīng)過特異性熒光染色(凋亡細胞呈綠色),中樞神經(jīng)損傷的斑馬魚在腦和脊髓部位會布滿凋亡細胞,比正常斑馬魚明顯增多,可以明顯被觀察到。
【實驗方案】
我們將受測試斑馬魚分成三組,分別是正常對照組、模型對照組和服用腦保護劑組。其中正常對照組未經(jīng)任何處理,模型對照組與服用腦保護劑組都攝入了等量的霉酚酸嗎啉乙酯(霉酚酸嗎啉乙酯通過溶解到養(yǎng)魚用水中的方式攝入到斑馬魚體內(nèi))。服用腦保護劑組在攝入霉酚酸嗎啉乙酯的同時攝入還原型谷胱甘肽、養(yǎng)血清腦顆粒和安宮牛黃丸之類的腦保護劑。
服用一段時間腦保護劑后,我們對斑馬魚整體進行特異性熒光染色,觀察中樞神經(jīng)細胞的凋亡情況。
【結(jié)果展示】
圖1. 斑馬魚中樞神經(jīng)保護表型圖。
黃色虛線區(qū)域為中樞神經(jīng),綠色光點為凋亡細胞
可以看到,服用腦保護劑組的中樞神經(jīng)情況與正常對照組比較相似,沒有明顯的細胞凋亡。
【評價結(jié)論】
1、 經(jīng)過每組30尾斑馬魚的對比實驗,服用腦保護劑組的中樞神經(jīng)情況與正常對照組相似,并未出現(xiàn)模型對照組大量凋亡細胞的情況;
2、本實驗證實了還原型谷胱甘肽、養(yǎng)血清腦顆粒和安宮牛黃丸具有明顯保護大腦(中樞神經(jīng))功效。