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【評(píng)價(jià)原理】
斑馬魚肝臟中有許多與哺乳動(dòng)物同源的脂質(zhì)代謝酶,與哺乳動(dòng)物對(duì)外源化學(xué)物質(zhì)的防御機(jī)制相當(dāng),包括酶的誘導(dǎo)和氧化應(yīng)激。而且斑馬魚幼魚通體透明,容易觀察到毒性表型。用乙醇可以誘發(fā)斑馬魚肝臟損傷,模擬人的肝臟疾病。
我們?cè)u(píng)價(jià)斑馬魚肝臟保護(hù)有4個(gè)指標(biāo):1.肝臟面積;2.肝臟變性程度;3.卵黃囊吸收延遲的發(fā)生率(卵黃囊是脂肪,卵黃囊吸收與肝功能密切相關(guān));4.肝臟病理切片。
【實(shí)驗(yàn)方案】
我們將受測(cè)試斑馬魚分成三組,分別是正常對(duì)照組、模型對(duì)照組和服用肝保護(hù)劑組。其中正常對(duì)照組未攝入對(duì)乙醇,模型對(duì)照組與服用肝保護(hù)劑組都攝入了等量的乙醇(乙醇通過(guò)溶解到養(yǎng)魚用水中的方式攝入到斑馬魚體內(nèi)。肝保護(hù)劑組在攝入對(duì)乙醇的同時(shí)攝入美他多辛之類的肝保護(hù)劑。
服用一段時(shí)間肝保護(hù)劑后,我們觀察斑馬魚肝臟及卵黃囊表型,同時(shí)觀察肝臟的病理結(jié)構(gòu)變化。
【結(jié)果展示】
圖1. 斑馬魚肝臟毒性表型圖
可以看到,模型對(duì)照組的斑馬魚肝臟腫大、變性、卵黃囊吸收延遲,而肝保護(hù)劑組肝臟腫大、變性和卵黃囊吸收延遲均有所恢復(fù)。
圖2. 斑馬魚肝臟細(xì)胞病理切片。
(紅箭頭:肝細(xì)胞腫大;黑箭頭:脂肪空泡樣變性)
從病理切片中也能看出來(lái),正常對(duì)照組肝細(xì)胞核規(guī)則清晰,肝細(xì)胞結(jié)構(gòu)正常,邊緣清晰。乙醇處理后,斑馬魚肝細(xì)胞結(jié)構(gòu)模糊、肝細(xì)胞核腫大,而肝保護(hù)劑組細(xì)胞和正常斑馬魚中形態(tài)相似。
【評(píng)價(jià)結(jié)論】
1.經(jīng)過(guò)每組30尾斑馬魚的對(duì)比實(shí)驗(yàn),肝保護(hù)劑組斑馬魚肝臟與正常對(duì)照組相似,并未出現(xiàn)模型對(duì)照組的肝臟腫大、肝變性和卵黃囊吸收延遲情況。
2.本實(shí)驗(yàn)證實(shí)了美他多辛具有保護(hù)肝臟作用。