利用斑馬魚模型評價抗血小板聚集性血栓作用

【評價原理】

花生四烯酸主要為AA在TXA2合成酶作用下生成TXA2，激活血小板，活化血小板通過GPⅡb／III a受體與纖維蛋白原交聯(lián)在一起形成血栓。斑馬魚擁有凝血因子、血小板受體，并對臨床應(yīng)用的抗凝血和抗血栓藥物具有很好的反應(yīng)，適合于血栓形成機制和治療藥物的評價。

軀干出現(xiàn)血栓后，血流速度便會減慢，回心血量便會減少。經(jīng)過紅細(xì)胞特異性染色（呈紅色），患有血小板聚集性血栓的斑馬魚心臟紅細(xì)胞數(shù)量比正常斑馬魚明顯減少。由于斑馬魚血液系統(tǒng)發(fā)育過程透明的特點，可以明顯被觀察到。患有血小板聚集性血栓的斑馬魚血流速度會明顯比正常斑馬魚明顯減慢，在血流分析儀下可以明顯觀察到。

【實驗方案】

我們將受測試斑馬魚分成三組，分別是正常對照組、模型對照組和抗血栓藥物組。其中正常對照組未攝入花生四烯酸，模型對照組與服用/注射抗血栓藥物組都攝入了等量的花生四烯酸（花生四烯酸通過溶解到養(yǎng)魚用水中或注射的方式攝入到斑馬魚體內(nèi)）?？寡ㄋ幬锝M在攝入花生四烯酸的同時攝入阿司匹林、氯吡格雷、丹參多酚酸、鹽酸地爾硫卓、血栓通、血塞通之類的抗血栓藥物。

服用一段時間抗血栓藥物后，我們（1）對斑馬魚做紅細(xì)胞特異性染色，觀察心臟紅細(xì)胞數(shù)量的變化；（2）觀察血流速度的變化。

【結(jié)果展示】

圖1. 斑馬魚心臟紅細(xì)胞表型圖。

綠色虛線區(qū)域為心臟，心臟內(nèi)紅色為紅細(xì)胞

可以看到，服用抗血栓藥物組的心臟情況與模型對照組比較，紅細(xì)胞數(shù)量明顯增多。

圖2. 斑馬魚血流速度。（與模型對照組比較，*** p < 0.001）

可以看到，服用抗血栓藥物組的血流情況與模型對照組比較，血流速度明顯加快。

【評價結(jié)論】

1.經(jīng)過每組30尾斑馬魚的對比實驗，服用抗血栓藥物組與模型對照組比較，心臟紅細(xì)胞數(shù)量明顯增加、血流速度明顯加快。

2.本實驗證實了阿司匹林、氯吡格雷、丹參多酚酸、鹽酸地爾硫卓、血栓通和血塞通具有顯著的抗血栓作用。