利用斑馬魚模型評價對caspase的誘導作用

【評價原理】

Caspase家族在細胞凋亡的調控上起著重要的作用。Caspase分為三大類：凋亡啟動因子、凋亡執(zhí)行因子和炎癥介導因子。凋亡啟動因子在級聯(lián)反應的上游，包括（Caspase-8和Caspase-9）等，能識別和激活下游的Caspase。Caspase-9參與線粒體途徑介導的細胞凋亡。凋亡執(zhí)行因子在級聯(lián)反應的下游，包括Caspase-3和Caspase-7等，作用于其特異性底物并導致細胞凋亡。Caspase-3是Caspase家族中的，最重要的凋亡執(zhí)行者之一，大多數(shù)引發(fā)細胞凋亡的因素，最終均需要通過caspase-3介導的信號傳遞途徑，它的活化是凋亡進入不可逆階段的標志。

我們評價斑馬魚對caspase的誘導作用有3個指標：1.對caspase 3的誘導作用；2.對caspase 8的誘導作用；3.對caspase 9的誘導作用。

【實驗方案】

我們將受測試斑馬魚分成兩組，分別是正常對照和供服用/注射試品組（供試品通過溶解到養(yǎng)魚用水中或注射的方式攝入到斑馬魚體內）。

服用/注射供試品一段時間后，利用特異性試劑盒檢測斑馬魚體內caspase的活性。

【結果展示】

圖1. 斑馬魚caspase3活性。（與正常對照組比較，*** p < 0.001）

圖2. 斑馬魚caspase8活性。（與正常對照組比較，*** p < 0.001）

圖3. 斑馬魚caspase9活性。（與正常對照組比較，*** p < 0.001）

可以看到，服用/注射供試品組與正常對照組比較caspase活性明顯上升。

【評價結論】

1.經(jīng)過每組30尾斑馬魚的對比實驗，服用/注射供試品組的斑馬魚caspase活性明顯上升，與正常對照組存在明顯的差別。

2.本實驗證實了該供試品對斑馬魚caspase有誘導作用。