利用斑馬魚模型評價多藥耐藥逆轉作用

【評價原理】

腫瘤治療中一個普遍存在的問題就是多藥耐藥。在化療引起的腫瘤耐藥機制中，腫瘤細胞的P-糖蛋白（P-gp）表達水平升高是主要機制之一。P-gp是一種細胞外轉運子，P-gp表達水平升高會導致進入腫瘤細胞會很快被轉運到細胞外，導致腫瘤細胞內的化療藥濃度達不到殺死腫瘤細胞的濃度，進而產生耐藥性。

讓正常斑馬魚攝入熒光底物（呈紅色），由于P-gp的存在，正常斑馬魚將熒光底物泵出體外，殘留在體內的熒光底物很少；而用P-gp抑制劑環(huán)孢菌素A處理后，P-gp的活性受到抑制，P-gp熒光底物不能被排出，殘留在斑馬魚體內的熒光底物增多。若某種藥物能夠增加熒光底物在斑馬魚體內的存留，則其可能是潛在的P-gp抑制劑。

【實驗方案】

我們將受測試斑馬魚分成兩組，分別是正常對照組和服用P-gp抑制劑組。斑馬魚提前P-gp抑制劑數小時，而正常斑馬魚和服用P-gp抑制劑組都攝入了等量的熒光底物（熒光底物通過溶解到養(yǎng)魚用水中的方式攝入到斑馬魚體內）。一定時間后，觀察斑馬魚卵黃囊熒光底物的殘留情況（卵黃囊熒光強度）來體現P-gp抑制劑逆轉多藥耐藥作用。

【結果展示】

圖1. 斑馬魚多藥耐藥表型圖

可以看到，服用P-gp抑制劑組的斑馬魚卵黃囊明顯比正常對照組的亮，說明其對P-gp有顯著的抑制作用。

【評價結論】

1.經過每組30尾斑馬魚的對比實驗，服用P-gp抑制劑組的斑馬魚卵黃囊明顯比正常對照組的亮，說明其對P-gp有顯著的抑制作用。

2.本實驗證實了環(huán)孢菌素A、維拉帕米具有逆轉多藥耐藥作用。